冻干培养的基础知识(冻干)
冻干,也称为冷冻干燥,是一种用于通过从样品中除去水来保存生物材料的过程,其包括首先冷冻样品,然后在非常低的温度下在真空下将其干燥。 冻干的样品可以比未处理的样品储存更长的时间。
为什么要冻干?
冻干或冷冻干燥细菌培养物 ,稳定培养物的长期储存,同时最大限度地减少可能由严格干燥样品造成的损害。
许多微生物在冻干时存活良好,并且可以在储存较长时间后容易地在培养基中再水化和生长。
冻干技术也用于生物技术和生物医药行业,以保存疫苗,血液样本, 纯化蛋白质和其他生物材料。
这个简短的实验室程序可以与任何商业上可用的冻干机一起使用,以保存您的培养物。
冻干过程
冻干过程实际上是一种称为升华的物理现象的应用:物质从固态转变为气态,而不是首先通过液相。 在冻干过程中,冷冻样品中的水分以水蒸气的形式被去除,而不是先解冻样品。
常见错误
当涉及到冻干时,最常见的错误之一是不知道样品的熔点,这使得难以选择正确的冻干机。
您的样品在此过程中可能会融化。 另一个常见的错误是,在架式冷冻干燥机上进行冷冻干燥时,冷冻更好。 在初次干燥过程中,您应该将搁板温度设置为低于样品的共晶温度。 应该有足够的热量来鼓励样品分子移动 - 但是防止熔化。
第三个错误是使用错误的设备作为样品。 由于冷冻干燥机用于小组设置,所以在购买之前您应该了解以下内容:
- 多少水分将被冻干
- 样品是什么(和共晶温度)
- 如何正确使用冷冻干燥机
如果设备使用不当,可能会破坏所有样品。 这给我们带来了另一个常见的错误:不维护真空泵。 泵必须处于良好的工作状态才能冻干。 在冷冻干燥过程的前后30分钟打开气镇运行泵将增加泵的使用寿命。 打开气镇将污染物清除出泵,以防止损坏内部组件。您应经常检查泵油是否有变色和颗粒,并根据需要更换油。 在冷冻干燥过程中,定期换油可使泵保持最佳真空状态。
最后,为您的冻干过程配备错误的冷冻干燥配件也可能是一个很大的错误。 你真空下需要塞子样品吗? 然后需要一个停止室。 你在瓶中冷冻干燥吗? 然后确保有一个带有端口的干燥室。
通过避免上述错误,您可以更好地保护冷冻干燥机和泵,并且在冷冻干燥完成时获得更好的样品。
参考
Labconco新闻。 “冷冻干燥过程中犯的五大错误。” http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes