5种DNA染色常见染料和可视化DNA

在用凝胶电泳分离材料后,有几种不同的染色剂可用于可视化和拍摄DNA 。 在许多选择中,这五种菌株是使用最广泛的溴化乙锭最常见的开始。 在处理这个过程时,重要的是不仅要了解菌株之间的差异,还要知道固有的健康风险。

  • 01溴化乙锭

    溴化乙锭很可能是用于可视化DNA的最着名的染料。 该染料可以用于凝胶混合物, 电泳缓冲液中或在运行后染色凝胶。 染料的分子粘附在DNA链上,并在紫外线下发出荧光,从而准确显示出凝胶中带的位置。 尽管有其优点,但缺点是溴化乙锭是一种潜在的致癌物质,所以必须小心处理。 由于使用这种凝胶的潜在健康风险,已找到替代品。
  • 02 SYBR黄金

    SYBR Gold染料可用于染色双链或单链DNA,或染色RNA。 SYBR Gold是溴化乙锭首次进入市场的替代品之一,它被认为比溴化乙锭更敏感。 一旦染料与核酸结合,该染料展现出1000倍的紫外荧光。 然后它可以穿透厚而高百分比的琼脂糖凝胶,并可用于甲醛凝胶。

    由于未结合分子的荧光很低,所以不需要脱色。 许可证持有人Molecular Probes(自推出SYBR Gold以来)开发并销售了更安全的溴化乙锭替代品SYBR Safe和SYBR Green。

  • 03 SYBR Green

    SYBR Green I和II染色剂(再次由Molecular Probes销售)针对不同目的进行了优化。 因为它们与DNA结合,它们仍然被认为是潜在的诱变剂,因此应该小心处理它们。 SYBR Green I对双链DNA更敏感,而SYBR Green II则最适合与单链DNA或RNA一起使用。 像流行的溴化乙锭染色剂一样,这些高度敏感的污渍在紫外线下发出荧光。
  • 04 SYBR安全

    SYBR Safe的设计是为了更安全地替代溴化乙锭和其他SYBR染色剂。 它不被视为有害废物,通常可以通过常规下水道系统(即下水道)进行处理,因为毒性测试表明没有急性毒性。 测试还表明,叙利亚仓鼠胚胎(SHE)细胞,人淋巴细胞,小鼠淋巴瘤细胞和AMES测试中几乎没有遗传毒性。 该染色剂可以与蓝光透照器一起使用,对可视化的DNA造成较小的损伤,并且为以后的克隆提供更好的效率。
  • 05伊娃格林

    Eva Green是一种绿色荧光染料,与其他染料相比,已被发现可抑制PCR的程度较低。 这对于定量实时PCR等应用非常有用。 如果您使用低熔点凝胶回收DNA,这也是一个不错的选择。 它在高温下非常稳定,自身荧光很低,但与DNA结合时荧光很强。 伊娃格林也被证明具有非常低或没有细胞毒性或致突变性。