学习如何在几个步骤中制作TAE缓冲区

该缓冲液用于研究DNA运动

TAE缓冲液是由Tris碱,乙酸和EDTA(Tris-acetate-EDTA)组成的溶液。 它历来是用于琼脂糖凝胶电泳分析由PCR扩增, DNA纯化方案或DNA克隆实验产生的DNA产物的最常用缓冲液。

该缓冲液具有低离子强度和低缓冲能力。 它最适合于大量(> 20 kb)DNA片段的电泳,并且需要经常更换或更长时间(> 4 h)的凝胶运行时间进行再循环。

考虑到这一点,您可能需要考虑几个批次的缓冲区。

考虑到缓冲区容易制作且步骤可以快速进行,一次制作多个批次不应该特别耗时或难以完成。 使用下面的说明,制作TAE缓冲区只需要30分钟。 就是这样:

准备EDTA储液

提前制备EDTA(乙二胺四乙酸)溶液。 在pH调节到约8.0之前,EDTA不会完全溶解到溶液中。 对于500毫升0.5M EDTA的储备溶液,称量93.05克EDTA二钠盐(FW = 372.2)。 溶于400毫升去离子水中,用氢氧化钠(NaOH)调节pH值。 最终解决方案达到500毫升。

鞭打TAE的股票解决方案

通过称量242克Tris碱(FW = 121.14)并将其溶解在约750毫升去离子水中制成TAE的浓缩(50x)储备溶液。

小心加入57.1毫升冰醋酸和100毫升0.5M EDTA(pH8.0)。 之后,调整溶液至最终体积1升。 该储备溶液可以在室温下储存。 该缓冲液的pH值没有调整,应该约为8.5。

准备TAE的工作解决方案

1×TAE缓冲液的工作溶液是通过在去离子水中将原液稀释50倍而制成的。

最终溶质浓度是40mM。 Tris-乙酸盐和1mM EDTA。 缓冲液现在可用于运行琼脂糖凝胶。

你需要什么缓冲区

由于制作TAE缓冲区只需要一组快速简单的指令,所需的材料数量不会过多。 您只需要EDTA二钠盐,Tris碱和冰醋酸。

根据需要制作缓冲液还需要一个pH计和校准标准。 你还需要600毫升和1500毫升烧杯或烧瓶以及量筒。 最后,你需要去离子水,搅拌棒和搅拌盘。

包起来

你打算在哪里制作缓冲区 - 在学校,工作场所或其他地点,比如你家? 在开始确认TAE缓冲区中的所有上述材料之前,请检查清单。

如果您不想为材料支付费用,建议选择在家外放置缓冲液。 您可以轻松订购您需要的在线材料或访问他们的专卖店。