如何制作这种免疫组织化学染色缓冲液
磷酸盐缓冲液（PBS）是一种常用于免疫组织化学（IHC）染色的缓冲液，常用于生物学研究。 PBS是含有磷酸氢钠，氯化钠以及在某些情况下含有氯化钾和磷酸二氢钾的水基盐溶液。
免疫组化染色
免疫组织化学是指通过使用与生物组织中的抗原特异性结合的抗体的原理，检测组织切片细胞中的抗原如蛋白质的过程。
免疫荧光染色是第一种免疫组织化学染色方法。
由于抗原 - 抗体结合反应，当使用荧光染料与抗体缀合时，抗原变得可见。当在荧光显微镜下通过激发特定波长的光来激活时，该过程发生。
溶液的渗透压和离子浓度与人体相同 - 它们是等渗的。
PBS的食谱
您可以通过多种方式准备PBS。 有多个公式。 其中一些不含钾，而另一些含有钙或镁 。
这个配方相对容易。 它用于10X PBS储备溶液（0.1M）。 但是，您也可以制作1X储备溶液，或者从10X配方开始稀释至1X。
整个过程大约需要10分钟。
还提供了添加Tween的选项。
您需要制作PBS缓冲液
- 磷酸二氢钠（无水）
- 磷酸氢二钠（无水）
- 氯化钠
- 秤和称重船
- 磁力搅拌器和搅拌棒
- 经过校准的pH探头和用于调节pH的适当溶液
- 1L容量瓶
- 吐温20（可选）
如何制作磷酸盐缓冲盐水（PBS）
称取10.9g无水磷酸氢二钠（Na 2 HPO 4），3.2g无水磷酸二氢钠（NaH 2 PO 4）和90g氯化钠（NaCl）。
仅在1L蒸馏水中溶解。
调整pH值至7.4，使溶液达到最终体积1L。
使用前稀释10倍，必要时重新调整pH值。
您可以通过向1L溶液中加入5mL吐温20来制备含有0.5％吐温20的PBS溶液。
制作PBS缓冲液的技巧
制成PBS溶液后，将缓冲液储存在室温下。
非无水试剂可以替代，但您必须重新计算每种试剂的适当质量以适应添加的水分子。
磷酸盐缓冲盐水（PBS）的用途
磷酸盐缓冲盐水具有许多用途，因为它对大多数细胞是等渗的和无毒的。 它可以用来稀释物质，它通常用来冲洗细胞容器。 例如，PBS可以用作干燥生物分子的各种方法中的稀释剂，因为其中的水分子将围绕物质蛋白质构成。 它将被“干燥”并固定在固体表面上。
pH保持稳定且一致以防止细胞破坏。
与物质结合的水薄膜防止变性或其他构象变化。 碳酸盐缓冲液可用于相同的目的，但效果较差。
在测量椭圆光度法中的蛋白质吸附时，PBS也可用于获取参考光谱。